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      首頁 食品安全快速檢測 乳及乳制品 維生素 B5 (泛酸)檢測試劑盒

      維生素 B5 (泛酸)檢測試劑盒

      檢測項目:營養成分

      適用樣本:奶粉

      規格
      96T/盒
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      產品介紹
      概述

      適用范圍?

      適用于奶粉中添加泛酸(維生素B5)含量的定量分析。該試劑盒可進行96次測定。?

      實驗原理

      泛酸(維生素B5)檢測試劑盒采用微生物方法定量檢測奶粉中添加泛酸的含量。微生物檢測體系與國際規范保持一致。植物乳桿菌的生長離不開泛酸,其生長強度與樣品中泛酸的含量有關,將含有植物乳桿菌的泛酸檢測培養基、樣品或標品加入到微孔中,37℃避光孵育,植物乳桿菌開始生長,直至泛酸被完全消耗,24小時完成孵育。采用酶標儀讀取610-630nm或540-550nm下樣品的渾濁度,將樣品濁度與標準曲線對比即可得到樣品中泛酸含量。

      檢測步驟

      1、標準品配制?

      1)打開無菌水瓶蓋:沿著箭頭方向向上推開藍色蓋帽,逆時針拉開鋁塑蓋,取下整個蓋帽,然后打開瓶塞,將瓶塞內側朝上放置。

      2)打開泛酸鈣標準品瓶蓋,取xmL無菌水加入標準品瓶中(x值見標準品瓶包裝標簽),蓋上瓶蓋,振蕩使標準品充分溶解,即為標準品工作液。

      3)取6個無菌管(1.5或2.0mL),將標準品工作液按照說明書表格進行稀釋。標準品必須現配現用。?

      ?*標注曲線中已經包含樣品40倍的提取稀釋倍數。?

      2、檢測培養基的配制?

      1)打開培養基瓶蓋,用無菌鑷子取出干燥劑并丟棄。?

      2)將10mL無菌水(必須取自試劑盒中)加入泛酸檢測培養基瓶中,蓋緊瓶蓋,振蕩混勻。?

      3)保證瓶蓋密閉的前體下,95℃水浴加熱5min,然后快速冷卻至室溫(低于30℃)。?

      4)使用0.22μm無菌濾膜過濾全部培養基,用15mL無菌離心管收集全部濾液。?

      5)取出凍干菌株,沿著箭頭方向向上推開藍色蓋帽,逆時針拉開鋁塑蓋,取下整個蓋帽,輕輕打開瓶塞,將瓶塞內側朝上放置;向菌株瓶內加入1mL無菌水(必須取自試劑盒中),用移液槍吹打混勻,取其中的YmL(Y值見菌株包裝瓶標簽)加入過濾后的培養基中,振蕩混勻,即為檢測菌液(檢測菌液須現配現用)。?

      注:如果培養基在處理的過程中出現較大體積的損失時,加入的凍干菌株體積需要做相應比例的調整。為杜絕實驗室污染,菌株瓶中剩余的菌再用瓶塞密封,及時清理出實驗室或者高壓滅菌處理;制備的檢測菌液如有剩余,也需要及時清理出實驗室或者高壓滅菌處理。?

      3、檢測步驟

      注:加入微孔板中的樣品必須為無菌樣品(使用試劑盒中提供的無菌水進行稀釋)。?

      1)取出所需數量的微孔條置于微孔架上,將剩余微孔板條放回鋁箔袋中密封,2-8℃儲存。?

      2)依次將140μL標準品或樣品、140μL檢測菌液加入微孔中(用標準品或樣品溶液潤洗槍頭),然后用粘膠薄膜蓋好微孔條(揭開粘膠薄膜的保護層,用手或壓舌板將粘膠薄膜壓平,使其充分封閉微孔板條)。注:保證粘膠薄膜和微孔的封閉性,特別注意微孔的邊緣部分。?

      3)在37℃培養箱中避光孵育24小時。?

      4)輕輕來回顛倒混勻微孔板,使菌液充分混勻,然后用一只手將微孔條固定于微孔架上,另一只手自右上方沿對角揭開粘膠薄膜,靜置2min待氣泡全部消去(較難消去的小氣泡用移液槍吸出)后用酶標儀在610-630nm或540-550nm下測量渾濁度。?

      注:孵育完成后,微孔板可在冰箱中保存的最長時間為48h,然后用酶標儀讀數。

      注意事項
      1)試劑盒應在2-8℃儲存,產品過期后請勿使用。 2)加入微孔板中的樣品必須無菌,樣品稀釋時必須使用試劑盒中提供的無菌水。樣品提取后必須在無菌的環境中進行操作,且實驗中需要的其他耗材也必須無菌。 3)檢測培養基會刺激眼睛、皮膚和黏膜,應小心使用。 4)試驗完成后必須按照規章對微孔條進行處理(如高壓滅菌)。 5)為確定樣品中是否存在抑制因素,應進行回收率測定。提取之前,向樣品中加入已知濃度的泛酸溶液,回收率應約為80-120%。當回收率較低時,表明存在抑制因素,應增加樣品稀釋倍數以消除抑制因素的影響。
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